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Plantarray高通量植物生理表型平臺:番茄如何避免缺水的損害

更新時間:2022-05-11 點擊量:1104

Plantarray是一款基于稱重的高通量、多傳感器生理表型平臺以及植物逆境生物學研究通用平臺。該系統(tǒng)可持續(xù)、實時測量位于不同環(huán)境條件下、陣列中每個植株的土壤-植物-空氣(SPAC)中的即時水流動。直接測量根系和莖葉系統(tǒng)水平衡和生物量增加,計算植物生理參數以及植物對動態(tài)環(huán)境的反饋。系統(tǒng)以有效、易用、無損的方式針對植物對不同處理的反應、預測植物生長和生產力進行定量比較,廣泛應用于生物脅迫和非生物脅迫以及植物栽培加速育種研究等,脅迫研究涵蓋干旱脅迫、鹽脅迫、重金屬脅迫、熱、冷脅迫、光脅迫以及灌溉/養(yǎng)分、CO2指示、植物健康等領域的研究。

植物采用氣孔關閉和減少生長以避免缺水的損害。生長促進激素赤霉素(GA)的水平降低導致對水分虧缺的耐受性增加,但其基本機制尚不清楚。研究表明,番茄DELLA蛋白質PROCERA(PRO),是GA信號傳導的負調節(jié)因子,在保衛(wèi)細胞中通過增加對脫落酸(ABA)的敏感性來促進氣孔關閉并減少水分虧缺。pro功能喪失的突變體在缺水脅迫下表現出增加的氣孔導度和快速萎蔫。過表達植株組成型的激活穩(wěn)定的DELLA蛋白(S-della),并表現出相反的表型。S-della對氣孔開度和水分流失的影響在ABA缺失突變體sitiens(sit)中被強烈抑制,表明S-della的這些作用是ABA依賴性的。盡管DELLA對ABA水平沒有影響,但與野生型相比,S-della中的保衛(wèi)細胞ABA反應性增加,而pro植物中的保衛(wèi)細胞ABA反應性降低。在保衛(wèi)細胞特異性啟動子的控制下表達S-della足以增加氣孔對ABA的敏感性并在缺水脅迫下減少水分損失,但對葉片大小沒有影響。這一結果表明DELLA促進氣孔關閉獨立于其對生長的影響。

關鍵詞:氣孔調節(jié);DELLA蛋白;保衛(wèi)細胞;ABA

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1. 番茄DELLA pro功能喪失的突變體在缺水條件下表現出快速失水

為了研究DELLA對植物水分狀況的影響,本文測試了DELLA功能喪失的番茄突變體pro(Bassel etal.2008)對缺水脅迫的反應。在缺水處理開始之前,將所有植物灌溉至飽和。4d后,未灌溉的pro植株開始萎蔫,而對照植株生長正常(圖1A)。干旱處理開始后第4天,pro的葉片相對含水量(RWC)降低了30%;而M82降低了10%(圖 1B)。上午10點在pro植株中測得的氣孔導度比M82的值高50%(圖 1C)。使用稱重傳感器(蒸滲儀)監(jiān)測溫室中灌溉植株的全株蒸騰作用,同時記錄每株植物的每日稱重變化情況。Pro植株的每日蒸騰速率顯著高于M82植株的測量值(圖1D)。對取自灌溉中的pro和M82植株背面葉表皮的印記進行顯微鏡分析顯示,pro(72 μm2) 植株的氣孔面積遠大于M82植株(37μm2;圖1E)。 pro氣孔略大于M82,二者密度相近(補充圖1)。這些結果表明,在pro中觀察到的快速失水是由于氣孔孔隙面積增加,進而導致氣孔導度和蒸騰作用增加。

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圖2. DELLA 活性促進保衛(wèi)細胞對 ABA 的反應

在灌溉與缺水條件下M82、pro和proΔ17葉片中的ABA含量沒有顯著差異(圖 5A),表明DELLA不會促進番茄葉片中ABA的積累。用不同濃度的ABA處理M82、pro和rgaΔ17葉片的去皮遠軸表皮條,發(fā)現三種植株的氣孔孔徑均有不同程度的減小,這些結果表明DELLA活性影響保衛(wèi)細胞對ABA的反應。除了對氣孔關閉的影響外,ABA 還促進基因表達,P5CS1和RAB18兩種基因在proΔ17保衛(wèi)細胞中的表達顯著高于M82(圖 5D 和 5E),表明S-della組成性地促進保衛(wèi)細胞中的 ABA反應。在H2O2積累的檢測中,proΔ17保衛(wèi)細胞對ABA的反應明顯強于M82。在所有的M82、pro 和 proΔ17檢查品系中山梨糖醇造成的氣孔關閉程度相近(圖5F),結果表明DELLA活性不參與ABA獨立的氣孔關閉。

Plantarray高通量植物生理表型平臺和植物逆境生物學生理研究平臺--番茄研究2

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Plantarray高通量植物生理表型平臺和植物逆境生物學生理研究平臺-西紅柿研究6

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